一区二区三区四区精品日韩-久久91久久久久麻豆精品-人妻佐知子中文字幕在线-欧美日一区二区在线观看

設(shè)為首頁 | 加入收藏
技術(shù)文章首頁 > 技術(shù)文章 詳細(xì)分析組織細(xì)胞固定液的使用方法及注意事項(xiàng)
  • 詳細(xì)分析組織細(xì)胞固定液的使用方法及注意事項(xiàng)
  • 點(diǎn)擊次數(shù):13300 更新時(shí)間:2019-05-17
  • 0
  •   組織細(xì)胞固定液的作用:
      組織經(jīng)一系列的處理后,就必須進(jìn)行固定,當(dāng)然有的組織是先固定,再進(jìn)行處理,然后再固定。固定的作用,從組織學(xué)的角度其簡單的定義是,保持細(xì)胞、組織的固有形態(tài)和結(jié)構(gòu),使之盡量保持細(xì)胞、組織的固有形態(tài)和結(jié)構(gòu),而從免疫組化技術(shù)的角度,固定的作用不僅是使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝固,盡量減少或終止外源性酶和內(nèi)源性酶的反應(yīng);防止細(xì)胞的自溶,以免使抗原擴(kuò)散至組織間質(zhì);以保持組織的固有形態(tài)和結(jié)構(gòu);更重要的是保持組織或細(xì)胞的抗原性,不但要使抗原不導(dǎo)致失活,而且不使抗原發(fā)生彌散的現(xiàn)象,才能在免疫組化染色時(shí),不產(chǎn)生過深的背景,影響對陽性物的判斷。
     
      組織細(xì)胞固定液的使用說明:
      1、對于細(xì)胞樣品,去除培養(yǎng)液后,按照每六孔板一個(gè)孔加入 1 毫升固定液的比例,加入 4%多聚甲醛固定液。對于細(xì)胞涂片等其它細(xì)胞樣品,加入固定液的量以充分蓋住樣品為準(zhǔn)。通常室溫固定 10-20 分鐘即可,但固定較長時(shí)間,例如 1-2 小時(shí)也是可以的。后續(xù)需使用適當(dāng)?shù)南礈煲撼浞窒礈煲匀コ龤埩舻亩嗑奂兹?/div>
      2、對組織切片,加入 4%多聚甲醛固定液量以充分覆蓋切片為準(zhǔn),或使用染色架進(jìn)行固定。通常室溫固定 10-20 分鐘即可完成固定,但切片較厚時(shí)可以固定較長時(shí)間,例如 1-2 小時(shí)。后續(xù)需使用適當(dāng)?shù)南礈煲撼浞窒礈煲匀コ龤埩舻亩嗑奂兹?/div>
      3、對于組織塊樣品,浸泡入 4%多聚甲醛固定液中,室溫或 4℃浸泡固定 2-24 小時(shí)。建議不超過 8 小時(shí),除非組織塊特別大,難以滲透。固定完成后,放入裝有蒸餾水的離心管中清洗,每 15-30 分鐘換一次,共 6-8 次,建議在搖床進(jìn)行,或用流水沖洗 1-2 小時(shí)。隨后梯度脫水,進(jìn)行包埋。如果暫時(shí)不包埋可放入 70-75%的酒精中保存。
     

      組織細(xì)胞固定液的注意事項(xiàng):
      1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。
      2、多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。
      3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 *掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%多聚甲醛固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
      4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
      5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
  • 上一篇:用這個(gè)方法來操作轉(zhuǎn)染試劑,工作效率更高哦!
  • 下一篇:Sigma液體培養(yǎng)基的使用原理及方法說明
移動(dòng)電話
15380906406
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息

化工儀器網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
平原县| 宜阳县| 汉沽区| 积石山| 灌云县| 惠州市| 永善县| 宜川县| 平昌县| 宁都县| 星座| 丘北县| 常州市| 彭水| 连城县| 凌海市| 清远市| 司法| 南阳市| 商洛市| 泰兴市| 石阡县| 襄汾县| 大安市| 缙云县| 铜鼓县| 湖南省| 咸阳市| 文成县| 信丰县| 湖州市| 常山县| 平湖市| 乌拉特后旗| 双桥区| 惠州市| 政和县| 龙泉市| 铜川市| 静安区| 类乌齐县|