CDCFDA, SE 活細(xì)胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
FS1197-25MG | CDCFDA, SE 活細(xì)胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE | 25mg | 1500.00 |
活細(xì)胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE
產(chǎn)品描述
活細(xì)胞熒光示蹤探針 CDCFDA, SE [5-(and-6)-Carboxy-2’,7’-dichlorofluorescein diacetate, succinimidyl ester]已被廣泛證實(shí),用CDCFDA 活細(xì)胞綠色熒光探針標(biāo)記細(xì)胞能有效確定總細(xì)胞的數(shù)量和一個(gè)樣本中存在多少活細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合熒光染色法是分析非均質(zhì)細(xì)胞種群的有力工具。
FDA 和它的衍生物無(wú)熒光分子進(jìn)入細(xì)胞后被胞內(nèi)無(wú)特異性的酯酶所水解產(chǎn)生熒光。這些熒光產(chǎn)物只能積聚在具有完整細(xì)胞膜的細(xì)胞中。因此,死細(xì)胞無(wú)完整細(xì)胞膜不能被染色。FDA 具備精que地膜轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)力學(xué)和胞內(nèi)水解作用或者類似物(CDCFDA)相關(guān)的細(xì)胞功能,因此可以通過熒光顯微鏡或者流式細(xì)胞儀來(lái)檢測(cè) FDA 標(biāo)記的細(xì)胞。過 FDA 熒光標(biāo)記的細(xì)胞在細(xì)胞系或者菌株中存在變化,可能是由于不同胞內(nèi)酯酶的活性所造成的。活細(xì)胞熒光示蹤探針 CDCFDA, 琥珀酰亞胺酯是一個(gè)胺化 FDA 衍生物,可以用來(lái)制備各種 FDA偶聯(lián)物。
產(chǎn)品屬性
英文名字: CDCFDA, SE [5-(and-6)-Carboxy-2’,7’-dichlorofluorescein diacetate, succinimidyl ester]
中文名稱: 活細(xì)胞熒光示蹤探針CDCFDA, SE
分子量:626.35
光譜特性:光譜學(xué)相關(guān)參數(shù)為Ex=504nm / Em=529nm
儲(chǔ)存條件:4℃,避光半年,-20℃,避光長(zhǎng)期保存
操作說明
細(xì)胞制備與染色
*的染色探針濃度取決于不同的應(yīng)用程序類型,此處建議的初始條件是基于驗(yàn)證的特定細(xì)胞類型,具體實(shí)驗(yàn)中應(yīng)摸索加以調(diào)整。測(cè)試建議至少十倍的濃度范圍內(nèi)。一般情況下,長(zhǎng)期染色(3 天以上)或者快速分裂的細(xì)胞使用需要 5~25μM 的染料。更短的實(shí)驗(yàn),如生存能力分析,可以采用 0.5~5μM。為了減少毒性負(fù)荷,選擇盡可能低的染料濃度。
1.1 用高品質(zhì) DMSO 溶解染料至終濃度為 10mM 儲(chǔ)液,儲(chǔ)液添加至無(wú)血清培養(yǎng)基中,保持終濃度
在 0.5~25μM 的工作濃度,孵育溫度為 37 度。
1.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到所需要求,即可離心收集細(xì)胞,棄上清,用預(yù)熱的染色輕柔重
懸,在細(xì)胞的生長(zhǎng)條件下孵育 15~45分鐘后,離心。對(duì)于貼壁細(xì)胞,當(dāng)達(dá)到合適匯合度后,去掉培養(yǎng)基,更換以預(yù)熱的染色液,在細(xì)胞的生長(zhǎng)條件下孵育 15~45 分鐘。
1.3 更換新鮮預(yù)熱的培養(yǎng)基,37 度另外孵育 30 分鐘,以保證胞內(nèi)酯酶充分水解。
1.4 吸取 5μL 的染色菌液至載玻片上,加蓋 18mm 正方形蓋玻片,熒光顯微鏡觀察。
1.5 如需進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析,可以收集細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度在 106/mL,按懸浮細(xì)胞孵育標(biāo)記方法之
后,上流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。
注意事項(xiàng)
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途
為了您的an全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。